知禾自主研發(fā)Cryo-SFI無血清細胞凍存液，具有獨特配方，適用于各種動物細胞株（腫瘤細胞和常規(guī)細胞）。該凍存液配方成分明確，無血清，無動物源蛋白，有效避免病毒和支原體污染，保證凍存細胞的安全。

產(chǎn)品應用：

適用于凍存：293細胞、CHO細胞、雜交瘤細胞、干細胞、免疫細胞、腫瘤細胞和組織

產(chǎn)品優(yōu)勢：省時、高效、方便、快捷

1.無血清，細胞可懸浮培養(yǎng)，產(chǎn)品配方明確，無動物源性污染；

2.兼容-80℃和液氮凍存；

3.快速凍存，無需梯度降溫；

4.高通量、微量凍存：96孔板、48孔板凍存

產(chǎn)品質(zhì)量：凍存周期長，細胞存活率高（>95%）

產(chǎn)品保存：

1.質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起，為期1年。

2.短期保存于2-8℃，長期保存于-20℃。

3.為避免反復凍融影響產(chǎn)品性能，大包裝產(chǎn)品推薦分裝后，存放于-20℃?zhèn)溆谩?/span>

使用方法：

Ⅰ. 常規(guī)細胞冷凍保存方法【細胞凍存管法】

選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。

1. 按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞，置于離心管中，細胞計數(shù)。

2. 離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm，RT, 3~5 min）。

3. 于離心管中加入適量的無血清細胞凍存液，使細胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻，制成細胞混合液。

4. 將細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。

5. 直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。

6. 若研究者需要液氮保存時，可將完全凍結(jié)的凍存管（放入-80℃冰箱后至少一晝夜）移至-196℃液氮罐。

Ⅱ. 凍存細胞復蘇方法【細胞凍存管法】

1. 從冰箱里取出細胞冷凍保存管，立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。

2. 待細胞混合液完全融化后，立即加入1 ml細胞培養(yǎng)基與細胞混合，再將細胞混合液移入含有4倍體積細3. 胞培養(yǎng)基的離心管中，混合均勻。

4. 離心收集培養(yǎng)細胞（參考離心條件：1,000~2,000 rpm，RT, 3~5 min），充分棄除離心上清。

5. 加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基，進行混合和稀釋。

6. 鏡檢后，研究者可根據(jù)各自方法和需要，調(diào)整細胞密度，進行細胞培養(yǎng)。

Ⅲ. 原位凍存法【孔板凍存法】

（1）對于貼壁細胞：

1. 孔板中細胞生長狀態(tài)良好且匯合度達到50%以上時，從細胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈。

2. 加入適量（體積根據(jù)孔板定，一般96孔板加100ul, 48孔板加200 ul）無血清細胞凍存液于培養(yǎng)孔板中，充分浸潤細胞。

3. 蓋上蓋板，做好密封措施，防止染菌。

4. 直接將含凍存液的細胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。

（2）對于懸浮細胞：

1. 孔板中細胞生長狀態(tài)良好且密度達到5×105至5×106cells/ml時，用水平離心機離心（參考離心條件：1,000~2,000rpm，RT, 3~5 min），從細胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈。

2. 加入適量（體積根據(jù)孔板定，一般96孔板加100ul, 48孔板加200 ul）無血清細胞凍存液于培養(yǎng)孔板中，充分浸潤細胞。

3. 蓋上蓋板，做好密封措施，防止染菌。

4. 直接將含凍存液的細胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱，長期冷凍保存。

Ⅳ. 原位凍存復蘇方法【孔板凍存法】

（1）對于貼壁細胞：

1. 從冰箱里取出冷凍的細胞培養(yǎng)板，立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍。

2. 待細胞凍存液完全融化后，將液體小心吸取干凈，立即加入適量細胞培養(yǎng)基。

3. 置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng)。

（2）對于懸浮細胞：

1. 從冰箱里取出冷凍的細胞培養(yǎng)板，立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍。

2. 待細胞凍存液完全融化后，用水平離心機離心（參考離心條件：1,000~2,000rpm，RT, 3~5 min），將液體小心吸取干凈，立即加入適量細胞培養(yǎng)基重懸細胞。

3. 置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng)。