1.無血清,,無動物源蛋白,有效避免病毒和支原體污染,。
2.使用方便,,凍存前無需程序降溫。
3.兼容-80度冰箱和液氮凍存,。
4.兼容孔板(如96孔板,、48孔板)和凍存管凍存。
1.96孔板大規(guī)??焖傥⒘績龃骐s交瘤細胞株候選克隆
2.無血清凍存293和CHO穩(wěn)定細胞株
3.常規(guī)凍存?zhèn)鞔毎?/span>
選擇凍存處于對數(shù)生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率,。
1.按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞,,置于離心管中,細胞計數(shù)
2.離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,,RT, 3~5 min)
3.于離心管中加入適量的無血清細胞凍存液,,使細胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢地混合均勻,,制成細胞混合液,。
4.將細胞混合液分裝于已標示完全的冷凍保存管中。
5.直接將含細胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,,長期冷凍保存,。
6.若研究者需要液氮保存時,可將完全凍結的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐,。
1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍,。
2.待細胞混合液完全融化后,,立即加入1 ml細胞培養(yǎng)基與細胞混合,再將細胞混合液移入含有4倍體積細胞培養(yǎng)基的離心管中,,混合均勻,。
3.離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,RT, 3~5 min),,充分棄除離心上清,。
4.加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基,進行混合和稀釋,。
5.鏡檢后,,研究者可根據(jù)各自方法和需要,,調(diào)整細胞密度,進行細胞培養(yǎng),。
對于貼壁細胞:
1. 孔板中細胞生長狀態(tài)良好且匯合度達到50%以上時,從細胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈,。
2. 加入適量(體積根據(jù)孔板定,,一般96孔板加100 ul, 48孔板加200 ul)無血清細胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,充分浸潤細胞,。
3. 蓋上蓋板,,做好密封措施,防止染菌,。
4. 直接將含凍存液的細胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱,,長期冷凍保存。
對于懸浮細胞:
1. 孔板中細胞生長狀態(tài)良好且密度達到5×105至5×106 cells/ml時,,用水平離心機離心(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,,RT, 3~5 min),從細胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈,。
2. 加入適量(體積根據(jù)孔板定,,一般96孔板加100 ul, 48孔板加200 ul)無血清細胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,充分浸潤細胞,。
3. 蓋上蓋板,,做好密封措施,防止染菌,。
4. 直接將含凍存液的細胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱,,長期冷凍保存。
對于貼壁細胞:
1.從冰箱里取出冷凍的細胞培養(yǎng)板,,立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍。
2.待細胞凍存液完全融化后,,將液體小心吸取干凈,,立即加入適量細胞培養(yǎng)基。
3.置37℃,,5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞:
1.從冰箱里取出冷凍的細胞培養(yǎng)板,立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍,。
2.待細胞凍存液完全融化后,用水平離心機離心(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,,RT, 3~5 min),,將液體小心吸取干凈,,立即加入適量細胞培養(yǎng)基重懸細胞。
3.置37℃,,5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng),。
1.質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,為期1年,。
2.短期保存于2-8℃,,長期保存于-20℃。
3.為避免反復凍融影響產(chǎn)品性能,,大包裝產(chǎn)品推薦分裝后,,存放于-20℃?zhèn)溆?/span>。
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