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名稱描述內(nèi)容

CF1001 Cryo-SFI無血清細(xì)胞凍存液

    發(fā)布時(shí)間: 2024-08-01 15:46    

產(chǎn)品特色

1.無血清,,無動(dòng)物源蛋白,,有效避免病毒和支原體污染。

2.使用方便,,凍存前無需程序降溫,。

3.兼容-80度冰箱和液氮凍存。

4.兼容孔板(如96孔板,、48孔板)和凍存管凍存,。

產(chǎn)品質(zhì)量:凍存周期長(zhǎng),細(xì)胞存活率高

 

 

產(chǎn)品應(yīng)用

1.96孔板大規(guī)??焖傥⒘?jī)龃骐s交瘤細(xì)胞株候選克隆

2.無血清凍存293和CHO穩(wěn)定細(xì)胞株

3.常規(guī)凍存?zhèn)鞔?xì)胞系

使用方法

一,、常規(guī)細(xì)胞冷凍保存方法【細(xì)胞凍存管法】

選擇凍存處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。

1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞,,置于離心管中,,細(xì)胞計(jì)數(shù)

2.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,RT, 3~5 min)

3.于離心管中加入適量的無血清細(xì)胞凍存液,,使細(xì)胞濃度為5×105至5×106 cells/ml,。緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液,。

4.將細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示完全的冷凍保存管中,。

5.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,長(zhǎng)期冷凍保存。

6.若研究者需要液氮保存時(shí),,可將完全凍結(jié)的凍存管(放入-80℃冰箱后至少一晝夜)移至-196℃液氮罐,。

二、凍存細(xì)胞復(fù)蘇方法【細(xì)胞凍存管法】

1.從冰箱里取出細(xì)胞冷凍保存管,,立即放入37℃振動(dòng)水浴槽中快速解凍,。

2.待細(xì)胞混合液完全融化后,立即加入1 ml細(xì)胞培養(yǎng)基與細(xì)胞混合,,再將細(xì)胞混合液移入含有4倍體積細(xì)胞培養(yǎng)基的離心管中,,混合均勻。

3.離心收集培養(yǎng)細(xì)胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,,RT, 3~5 min),,充分棄除離心上清。

4.加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基,,進(jìn)行混合和稀釋,。

5.鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要,,調(diào)整細(xì)胞密度,,進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

三,、原位凍存法【孔板凍存法】

對(duì)于貼壁細(xì)胞:

1. 孔板中細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好且匯合度達(dá)到50%以上時(shí),,從細(xì)胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈。

2. 加入適量(體積根據(jù)孔板定,,一般96孔板加100 ul, 48孔板加200 ul)無血清細(xì)胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,,充分浸潤(rùn)細(xì)胞。

3. 蓋上蓋板,,做好密封措施,,防止染菌。

4. 直接將含凍存液的細(xì)胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱,,長(zhǎng)期冷凍保存,。

對(duì)于懸浮細(xì)胞:

1. 孔板中細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好且密度達(dá)到5×105至5×106 cells/ml時(shí),用水平離心機(jī)離心(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,,RT, 3~5 min),,從細(xì)胞培養(yǎng)板中將培養(yǎng)基上清小心吸取干凈。

2. 加入適量(體積根據(jù)孔板定,,一般96孔板加100 ul, 48孔板加200 ul)無血清細(xì)胞凍存液于培養(yǎng)孔板中,,充分浸潤(rùn)細(xì)胞。

3. 蓋上蓋板,,做好密封措施,,防止染菌,。

4. 直接將含凍存液的細(xì)胞培養(yǎng)板放入-80℃冰箱,長(zhǎng)期冷凍保存,。

四,、原位凍存復(fù)蘇方法【孔板凍存法】

對(duì)于貼壁細(xì)胞:

1.從冰箱里取出冷凍的細(xì)胞培養(yǎng)板,立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍,。

2.待細(xì)胞凍存液完全融化后,,將液體小心吸取干凈,立即加入適量細(xì)胞培養(yǎng)基,。

3.置37℃,,5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞:

1.從冰箱里取出冷凍的細(xì)胞培養(yǎng)板,,立即放入37℃培養(yǎng)箱中解凍,。

2.待細(xì)胞凍存液完全融化后,,用水平離心機(jī)離心(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,,RT, 3~5 min),將液體小心吸取干凈,,立即加入適量細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。

3.置37℃,5%CO2培養(yǎng)箱常規(guī)傳代培養(yǎng),。

產(chǎn)品保存

1.質(zhì)量保障期從產(chǎn)品的生產(chǎn)日期起,,為期1年。

2.短期保存于2-8℃,,長(zhǎng)期保存于-20℃,。

3.為避免反復(fù)凍融影響產(chǎn)品性能,大包裝產(chǎn)品推薦分裝后,,存放于-20℃?zhèn)溆?/span>,。



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